CD137分子通过活化T细胞核因子c1调控血管平滑肌细胞表型转变

作者：仲威; 李波; 刘俊; 徐源; 陈蕊; 邵晨; 王中群; 严金川

来源：中华心血管病杂志, 2017, 45(09): 799-804.

• 动脉粥样硬化
• 抗原,CD137
• 肌细胞,平滑肌

目的探讨CD137分子信号是否通过活化T细胞核因子c1(NFATc1)调控血管平滑肌细胞(VSMC)表型转变。方法将小鼠VSMC采用组织块贴块法原代培养,细胞分为对照组、CD137刺激组和CD137抑制组,以CD137L重组蛋白及抗CD137阻断型抗体分别激动和抑制CD137信号。在小干扰RNA试验中,将小鼠VSMC分为对照序列组与si-NFATcl组并分别转染对照序列与si-NFATc1序列。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测VSMC中NFATc1和表型蛋白、肌动蛋白α(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、波形蛋白的表达;免疫荧光和Western blot检测核蛋白中NFATc1活化水平。采用Transwell迁移实验检测穿膜细胞数目,比较细胞迁移能力。结果与对照组比较,CD137刺激组中VSMC中NFATc1(5.07±0.36比1.00±0.00)及波形蛋白(3.23±0.27比1.00±0.00)表达较高(P均<0.05),而α-SMA(0.73±0.15比1.00±0.00)、SM-MHC(0.45±0.05比1.00±0.00)表达较低(P均<0.05)。与CD137刺激组比较,CD137抑制组NFATc1(1.56±0.27比5.07±0.36)和波形蛋白(1.21±0.17比3.23±0.27)表达较低(P均<0.05),而α-SMA(2.01±0.43比0.73±0.15)和SM-MHC(2.85±0.32比0.45±0.05)表达较高(P均<0·05)。与对照序列组比较,siNFATc1组VSMC的SM-MHC、α-SMA的mRNA及蛋白水平较高,而波形蛋白表达较低(P均<0.05)。细胞迁移实验显示,CD137L刺激组细胞迁移数量高于对照组(3.85±0.31比1.00±0.00,P<0.05),而抑制NFATc1后迁移细胞数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0·05)。结论 CD137信号通过NFATc1参与VSMC表型调控。

• 单位
  江苏大学附属医院