黄体生成素受体对睾丸间质干细胞增殖分化的影响

作者:汪富林; 夏凯; 冯鑫; 庄**; 周明宽; 廖武源; 雷振明; 项鹏; 邓春华; 涂响安*
来源:新医学, 2021, 52(05): 352-359.
DOI:10.3969/j.issn.0253-9802.2021.05.011

摘要

目的探讨黄体生成素受体(LHCGR)对睾丸间质干细胞(SLC)增殖及分化能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫荧光染色比较LHCGR-/-小鼠与LHCGR+/+小鼠睾丸内SLC标志物的表达情况。通过流式细胞术分选出SLC,进行5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)及CCK-8增殖实验。同时诱导SLC向睾丸间质细胞(LC)分化,14 d后检测上清液睾酮水平。qRT-PCR及免疫荧光检测诱导分化后LC标志物表达水平。结果 LHCGR-/-小鼠睾丸内存在SLC,应用CD51标记并通过流式分选可获得SLC。LHCGR-/-小鼠SLC EdU+细胞比例和CCK-8增殖曲线与LHCGR+/+小鼠比较差异均无统计学意义(P均> 0.05)。LHCGR-/-小鼠SLC诱导分化后培养基上清液睾酮平均水平仅为0.01 ng/ml,低于LHCGR+/+对照组的2.71 ng/ml(P <0.001),其诱导分化后细胞LC标记物的表达也低于LHCGR+/+小鼠(P均<0.001)。结论敲除LHCGR基因后,睾丸内存在SLC且能维持正常的增殖活性,但是分化为LC受阻。

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