胆管癌干细胞的分离、培养及鉴定

作者:王晓博; 邓小峰; 朱建伟; 刘志鹏; 马望; 耿艺维; 熊力; 文宇; 苗雄鹰
来源:中国普通外科杂志, 2016, 25(02): 219-224.

摘要

目的:从人胆管癌细胞系QBC-939中分离具有干细胞特征的肿瘤细胞,为后续胆管癌干细胞的研究提供材料。方法:用无血清培养法及流式细胞分选法从QBC-939细胞中分离得到具有干细胞特征的CD133+Ep CAMhigh干细胞样细胞,继续在无血清培养基中培养,观察其成球能力,并比较CD133+Ep CAMhigh干细胞样细胞与QBC-939细胞单克隆形成率、耐药性,增殖能力,干细胞相关核转录因子OCT-4、Bmi-1、E-cadherin蛋白表达情况,以及BALB/c小鼠皮下移植后的成瘤能力。结果:在无血清培养基中,CD133+Ep CAMhigh干细胞样细胞具有较强的成球能力。与QBC-939细胞比较,CD133+Ep CAMhigh干细胞样细胞克隆形成率、洛铂耐药性、增殖明显增加;干细胞相关核转录因子OCT-4、Bmi-1表达明显增加,而E-cadherin表达明显降低;皮下移植瘤形成率明显增加。以上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:从人胆管癌QBC-939细胞中分离的干细胞样细胞具有肿瘤干细胞特性,可用于胆管癌干细胞的研究。