摘要
目的端粒酶活性的检测方法-TRAP技术被广泛应用于肿瘤相关研究。方法用293T细胞优化端粒酶活性反应体系,并用优化的TRAP方法检测3种乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和SK-BR-3)的端粒酶活性。结果 293T细胞端粒酶活性随蛋白含量的降低逐渐下降。当反应体系中加入含10 ng蛋白的细胞裂解液时,尚有明显的PCR扩增条带。3种乳腺癌细胞系端粒酶活性随着反应体系中蛋白浓度的下降而下降。MDA-MB-231端粒酶活性最高,MCF-7次之,SK-BR-3端粒酶活性最低。结论优化了 TRAP端粒酶活性检测方法并检测3种乳腺癌细胞系的端粒酶活性。优化的TRAP方法具有更高的敏感性并且降低了检测成本,可被广泛应用于肿瘤细胞及永生化细胞端粒酶活性的检测。
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