青蒿琥酯调控NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路减轻脑出血小鼠炎症及保护神经功能的作用研究

作者：李媛; 木艳玲; 薛孟周^*

来源：中国全科医学, 2023, 26(33): 4194-4202.

• 脑出血
• 炎症
• 青蒿琥酯
• NOD样受体蛋白3
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1
• 小鼠

背景 炎症反应是脑出血（ICH）病情进展的主要因素。青蒿琥酯（ART）具有抗菌和抗炎的药理活性，ART在脑内浓度较高，但对脑出血损伤的神经保护作用尚不清楚。目的 观察ICH后ART对炎症反应的影响并探讨其机制。方法 2022年3月—2023年2月选取108只8～10周雄性SPF级C57BL/6小鼠，随机分为假手术组（Sham组，n=36）、ICH对照组（ICH+Vehicle组，n=36）、ART治疗组（ICH+ART组，n=36），建立ICH模型，ICH+ART组在造模后2 h腹腔注射ART溶液150 mg·kg-1·d-1,ICH+Vehicle组腹腔注射5%碳酸氢钠溶液，连续注射3 d。观察小鼠行为学指标，HE染色观察各组小鼠脑组织损伤情况，免疫组织化学染色检测白介素（IL）6、IL-1β、髓过氧化物酶（MPO）单位面积阳性细胞数，兔抗小胶质标志物（IBA1）免疫荧光染色观察小胶质细胞/巨噬细胞的激活情况，TUNEL/NeuN免疫荧光双染色观察神经元死亡情况，蛋白质印迹法比较小鼠MPO、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关颗粒样蛋白（ASC）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平。结果ICH+Vehicle组改良神经系统严重程度评分、右转弯的百分比高于Sham组，ICH+ART组低于ICH+Vehicle组（P<0.05）。HE染色结果示Sham组纹状体周围有少量血液，水肿可忽略不计，ICH+Vehicle组脑组织严重损伤，细胞间隙增加、血管周围血肿、炎性细胞浸润增加；ICH+ART组上述症状均有明显改善。ICH+Vehicle组IL-6、IL-1β、MPO单位面积阳性细胞数均高于Sham组，ICH+ART组IL-6、IL-1β、MPO单位面积阳性细胞均低于ICH+Vehicle组（P<0.05）。ICH+Vehicle组小胶质细胞/巨噬细胞激活数高于Sham组，ICH+ART组低于ICH+Vehicle组（P<0.05）。3组小鼠神经元死亡数量比较，差异有统计学意义（P<0.05），其中ICH+Vehicle组高于Sham组，ICH+ART组低于ICH+Vehicle组（P<0.05）。ICH+Vehicle组MPO、IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC和Caspase-1水平均高于Sham组，ICH+ART组MPO、IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC和Caspase-1水平均低于ICH+Vehicle组（P<0.05）。结论 ICH后ART治疗可通过靶向调节NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路减轻小鼠纹状体炎症反应，减少小胶质细胞激活，最终减轻纹状体神经元凋亡并改善脑水肿。

• 单位
  郑州大学; 郑州大学第二附属医院