外源性IL-34对实验性小鼠结肠炎的影响

作者：陈冰倩; 黄伟; 杨君伶; 刘肇修^*

来源：现代消化及介入诊疗, 2023, 28(09): 1104-1110.

• 炎症性肠病
• 白介素34
• 疾病活动度
• 肠黏膜屏障

目的 研究人源IL-34重组蛋白对实验性小鼠肠炎的保护作用，初步探究IL-34在肠黏膜屏障中的作用及分子机制。方法 1.将20只6～8周C57BL/6J雄性小鼠随机分为两组，每组10只，利用2%葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium, DSS)诱导小鼠急性结肠炎模型。其中，实验组分别在DSS造模的第0、1、4、7天腹腔注射rhIL-34蛋白(100 ng/mL),对照组则在相同时间点腹腔注射同剂量的PBS。造模结束后取小鼠全结肠，评估两组小鼠的体重、结肠长度、疾病活动性指数(disease activity index, DAI)及组织病理损伤程度，明确rhIL-34对小鼠急性结肠炎的保护作用；利用蛋白质免疫印迹、免疫组化等实验探究两组小鼠结肠组织中E-cadherin、ZO-1以及Occludin的表达差异，评估rhIL-34对小鼠肠黏膜屏障的影响。2.采用NCM460细胞构建体外细胞模型。其中，实验组采用DSS处理NCM460细胞构建细胞炎症模型，对照组采用同剂量的PBS处理相同时间，qRT-PCR实验检测炎症相关基因的表达，验证造模是否成功；为了进一步探究rhIL-34对细胞的保护作用，在NCM460细胞中提前加入rhIL-34预处理6 h、12 h、24 h(100 ng/mL),后加入DSS诱导细胞炎症模型，24 h后收集细胞，使用蛋白质印迹法、qRT-PCR检测各组细胞中E-cadherin、ZO-1以及Occludin的表达差异。最后利用RNA-Sequencing分析各组样本间的差异表达基因谱。结果 1.小鼠肠炎模型结果显示：与对照组相比，rhIL-34腹腔注射组的小鼠体重下降及结肠缩短程度显著减轻、DAI评分下降以及结肠组织损伤程度减弱。并且发现，rhIL-34腹腔注射组小鼠结肠组织中E-cadherin、ZO-1以及Occludin蛋白的表达显著升高。2.体外细胞炎症模型结果显示：rhIL-34提前处理24 h的NCM460细胞中的E-cadherin、ZO-1以及Occludin的表达水平较对照组显著升高。结论 rhIL-34可能通过改善肠黏膜屏障，对DSS诱导的实验性小鼠结肠炎起保护作用。

• 单位
  南通大学附属医院