人骨形成蛋白7基因重组2型腺相关病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

作者：康焱; 廖威明; 盛璞义; 张珑涓; 原向伟; 雷磊; 黄保丁

来源：中华外科杂志, 2007, 45(18): 1279-1283.

DOI：10.3760/j.issn:0529-5815.2007.18.018

• 骨髓祖代细胞
• 中胚层
• 人骨形成蛋白
• 腺相关病毒 Myeloid progenitor cells
• Mesoderm
• Bone morphogenetic protein
• Adenoassociated virus

目的构建人骨形成蛋白7基因(hBMP7)重组腺相关病毒载体,并观察其在兔骨髓间充质干细胞中的表达。方法将骨形成蛋白7基因片段克隆入穿梭质粒 pUC18获得重组质粒pUC18-hBMP7。Kpn Ⅰ和 Sa Ⅱ双酶切质粒 pUC18-hBMP7与 pSNAV,用 T4DNA 连接酶连接分别回收的两片段后转化大肠杆菌 DH5α感受态细胞,获得重组质粒 PSNAV-hBMP7,转染 BHK-21细胞,筛选培养,用能表达 Rap 和 Cap 的重组Ⅰ型单纯疱疹病毒 HSV1_(-rc)/ΔUL2感染此细胞,裂解细胞收获病毒液。采用氯仿处理-PEG/NaCl 沉淀-氯仿抽提法分离浓缩、纯化与测定病毒滴度...

• 单位
  中山大学附属第一医院