实时荧光定量PCR法检测日本血吸虫

作者：周立; 梁冰; 赵友云; 黄露; 王业富

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2008, (04): 299-303.

• 日本血吸虫
• 荧光定量PCR
• TaqMan探针
• 18S小亚基单位核糖体核酸 Schistosoma japonicum
• Real-time PCR
• TaqMan probe
• 18SrRNA

目的运用实时荧光定量PCR法检测日本血吸虫。方法根据日本血吸虫18S小亚基单位核糖体核酸(18SrRNA)基因设计特异性引物,PCR扩增出1450bp序列,经TA克隆后转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为模板制作荧光定量PCR标准曲线。方法重现性评价,用初始循环数(Ct,拷贝/反应)进行标准差分析,并计算变异系数(CV)。结果制作的标准曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.9987。方法重现性评价,在1.05×107～1.05×103个拷贝范围内,对应的Ct平均值分别为17.55、20.93、24.32、27.59和30.95;CV值分别为1.31%、1.53%、...

• 单位
  病毒学国家重点实验室; 武汉大学