共表达寨卡病毒和基孔肯雅病毒结构蛋白的重组腺病毒候选疫苗的构建及免疫效果评价

作者：曹亮; 高越; 汪伟; 孙文超; 田明尧^*; 鲁会军; 徐海月; 方芳; 金宁一^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(12): 1556-1562.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0192

• 寨卡病毒
• 基孔肯雅病毒
• 重组腺病毒
• 免疫评价

应用人腺病毒5型载体构建共表达寨卡病毒(ZIKV)和基孔肯雅病毒(CHIKV)结构蛋白的重组腺病毒候选疫苗,通过免疫BALB/c小鼠验证候选疫苗的免疫原性,为预防ZIKV及CHIKV感染提供依据。首先构建含有ZIKV prME基因和CHIKV E2-6K-E1基因的重组腺病毒穿梭质粒,而后通过与骨架质粒共同转染HEK293细胞包装共表达ZIKV及CHIKV结构蛋白的重组腺病毒rAd-ZIKV-CHIKV,并进行Westernblot检测。将构建的重组腺病毒候选疫苗免疫BALB/c小鼠,通过检测血清特异性抗体及中和抗体、T淋巴细胞增殖水平验证重组腺病毒候选疫苗的免疫效果。Western-blot结果显示,所构建的重组腺病毒能够表达68 ku的ZIKV prME蛋白和98 ku的CHIKV E2-6K-E1蛋白。小鼠免疫试验结果显示,首免后第35天时免疫重组腺病毒候选疫苗小鼠ZIKV及CHIKV特异性抗体、中和抗体及淋巴细胞增殖水平均显著高于腺病毒野毒ad-wt对照组。结果表明,所构建的重组腺病毒候选疫苗能够诱导小鼠产生体液免疫及细胞免疫应答以预防ZIKV及CHIKV感染。

• 单位
  吉林医药学院; 温州大学