miR-335-5p靶向调控Galectin-3调节前列腺癌细胞免疫逃逸的机制研究

作者：周汝宝; 郭宗华; 杨君; 徐娓; 赵克栋; 饶志刚; 孔东波; 江波涛

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(13): 2431-2437.

• miR-335-5p
• 前列腺癌
• 半乳糖凝集素-3
• 免疫逃逸

目的:探讨miR-335-5p靶向调控半乳糖凝集素-3(Galectin-3)对前列腺癌细胞免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR检测正常前列腺上皮细胞WPMY-1及前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU145中miR-335-5p的表达；将PC-3细胞分为：NC组、mimics NC组、miR-335-5p mimics组、miR-335-5p mimics+pcDNA组、miR-335-5p mimics+pcDNA-Galectin-3组，qRT-PCR检测各组细胞中miR-335-5p表达；western blot检测各组细胞中Galectin-3蛋白表达。将上述5组细胞分别与自然杀伤细胞NK-92MI共培养后，ELISA法检测共培养细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)水平；CCK-8法检测NK-92MI细胞的免疫杀伤率；流式细胞术检测NK-92MI细胞凋亡率；双荧光素酶报告基因、RNA下拉、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证miR-335-5p与Galectin-3的靶向关系。结果:与正常前列腺上皮细胞WPMY-1比较，前列腺癌细胞LNCaP、PC-3、DU145中miR-335-5p的表达水平显著降低(P<0.05),且PC-3细胞中miR-335-5p的表达水平最低，因此选用PC-3细胞为后续研究对象；与NC组比较，miR-335-5p mimics组PC-3细胞中miR-335-5p表达水平显著升高，Galectin-3蛋白表达显著降低(P<0.05);与NC共培养组比较，miR-335-5p mimics共培养组细胞上清液中TNF-α、IFN-γ水平及NK-92MI细胞免疫杀伤率显著升高，NK-92MI细胞凋亡率降低(P<0.05);与miR-335-5p mimics组比较，miR-335-5p mimics+pcDNA-Galectin-3组PC-3细胞中miR-335-5p表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Galectin-3蛋白表达显著升高(P<0.05);与miR-335-5p mimics共培养组比较，miR-335-5p mimics+pcDNA-Galectin-3共培养组细胞上清液中TNF-α、IFN-γ水平及NK-92MI细胞免疫杀伤率显著降低，NK-92MI细胞凋亡率升高(P<0.05);miR-335-5p靶向负调控Galectin-3表达。结论:过表达miR-335-5p通过靶向下调Galectin-3表达来抑制PC-3细胞免疫逃逸。

• 单位
  咸宁市中心医院; 湖北科技学院附属第一医院