猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达

作者：娄忠子; 杨彬; 兰喜; 李学瑞; 李志勇; 殷相平; 李宝玉; 柳纪省

来源：畜牧与兽医, 2010, (12): 67-72.

• 猪圆环病毒2型
• 核衣壳蛋白
• 猪γ-干扰素
• 双表达载体
• 抗性筛选

通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪,γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-γ中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV。重组质粒转染BHK-21细胞后进行Zeocin~(TM)抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-γ在BHK-21细胞中的表达。结果显示,试验中筛选出1株Zeocin~(TM)抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室