非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

作者：郭振华; 邢广旭; 翁茂洋; 金前跃; 乔松林; 张改平^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(04): 619-625.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.04.01

• 非洲猪瘟病毒
• 荧光定量PCR
• B646L基因
• MGF505-2R基因
• CD2v基因

针对非洲猪瘟病毒B646L、MGF505-2R和CD2v基因分别设计了引物和探针，经过条件优化，建立了基于TaqMan探针技术的三重荧光定量PCR检测方法。结果显示，本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见病毒的核酸不发生交叉反应，具有良好的特异性；敏感性分析显示，针对B646L、MGF505-2R和CD2v基因的最低检测下限分别为6.5,8.0和14.0 copies/μL;并且该方法在101～107 copies/μL模板范围内具有良好的线性关系，组间变异系数为0.05%～2.68%,组内变异系数为0.10%～1.17%,稳定性良好。进一步针对临床核酸样品的检测显示，本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的荧光定量PCR鉴别检测方法，为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。

• 单位
  河南省农业科学院; 河南农业大学