实时RT-PCR基因表达相对定量REST~软件分析与2~((-ΔΔCT))法比较

作者：庾蕾; 刘建平; 庄志雄; 杨淋清; 张仁利; 叶小明; 程锦泉

来源：热带医学杂志, 2007, (10): 956-958.

• 实时RT-PCR
• 相对定量
• 标准曲线
• 基因表达 real-time RT-PCR
• relative quantification
• standard curve
• gene expression

目的利用实时RT-PCR技术建立一种简便、准确的基因表达相对定量方法。方法以正常的人支气管上皮细胞株(16HBE)cDNA为模板5倍系列稀释,分别作DNA聚合酶K(POLK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因标准曲线。以不同剂量反式二羟环氧笨并芘(anti-BPDE)诱导的16HBE、anti-BPDE转化的16HBE及肺癌细胞株(H1299)cDNA为模板,进行实时定量RT-PCR。以GAPDH基因作为内参照,进行POLK基因表达相对定量。实验数据分别采用2(-ΔΔCT)法及REST软件分析。结果5倍系列稀释法制作的标准曲线,呈现较好的线型关系(Rsq0.997)。POLK及GAPDH基...

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 深圳市疾病预防控制中心