应用凝血酶滴定法,比较不同提取方法的提取效率和不同相对分子质量的超滤膜对菲牛蛭抗凝血酶活性成分的分离作用,并用SDS-PAGE电泳测定分离得到抗凝活性成分的相对分子质量。结果表明:盐提取法更优于水提法、水提醇沉法和丙酮法;用盐提法对菲牛蛭头部提取的抗凝成分活性达1 811.11 U·g-1,选择10×103和30×103的超滤膜进行再次超滤得抗凝成分相对分子质量约为15.96×103。