摘要

目的 :检测肝细胞癌(HCC)中Twist的表达水平,并分析其对HCC细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:q RT-PCR检测HCC组织和细胞中Twist m RNA相对表达水平,Western blotting实验检测HCC细胞中Twist蛋白表达水平。si-Twist质粒转染至Hep G2细胞中为实验组,同时设置阴性对照组(转染si-NC质粒)和对照组(无转染),q RT-PCR和Western blotting实验检测转染效率。MTT和集落形成实验、Transwell实验、Western blot实验分别检测Twist敲低后对细胞增殖、侵袭和EMT相关蛋白表达的影响。结果:HCC组织和细胞中Twist m RNA和蛋白表达水平增加;实验组Twist的2-ΔΔCt值为0.32±0.08,明显低于对照组(1.00±0.10)和阴性对照组(1.02±0.09),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组Twist蛋白灰度值为0.24±0.11,明显低于对照组(1.00±0.07)和阴性对照组(0.98±0.12),差异有统计学意义(P<0.001);实验组72 h的OD值为0.72±0.06,显著低于对照组(1.20±0.10)和阴性对照组(1.27±0.08),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组形成的集落细胞数16.33±2.52显著低于对照组(44.67±4.51)和阴性对照组(47.12±4.05),差异有统计学意义(P<0.001);实验组发生侵袭的细胞数为54.33±9.50,低于对照组(102.14±12.50)和阴性对照组(105.62±14.35),差异有统计学意义(P<0.001);与对照组和阴性对照组相比,实验组E-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平增加,波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏着蛋白(N-cadherin)的表达水平降低。结论:Twist在肝癌组织中的表达水平增加,敲低其表达水平后可抑制细胞的增殖、侵袭和EMT。

  • 单位
    南阳市第二人民医院