摘要
目的 利用微流控芯片恒温扩增技术(LAMP-Disk)建立多种呼吸道病原体快速检测的方法,并对其临床应用的可行性和价值进行评估。方法 设计和筛选针对甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、鼻病毒和肺炎支原体的LAMP引物对,利用盘式微流控芯片建立快速检测方法。以人工构建的参考品确定LAMP-Disk方法的检出限和分析特异性。收集268份呼吸道感染患儿的咽拭子样本,使用荧光定量PCR(qPCR)法与LAMP-Disk进行平行检测,从灵敏度、特异性及总体符合率等方面比较两种方法在临床应用的相关性和差异。结果 LAMP-Disk检测方法对7种呼吸道病原体的检出限为3000~30000 copies/mL。在268份样本中,以qPCR方法为金标准,LAMP-Disk检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、鼻病毒和肺炎支原体的灵敏度分别为90.0%、86.5%、90.6%、64.8%、75.0%、88.2%和91.4%;特异性分别为99.6%、100%、99.2%、99.5%、99.2%、99.6%和100%;总体符合率为98.9%、98.1%、98.1%、92.5%、97.0%、98.9%和98.9%。结论 采用LAMP-Disk方法同时检测多种呼吸道病原体,特异性和灵敏度好,操作简单快速,适合快速检测的应用场景。
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