摘要

目的探讨伽玛刀治疗对胶质瘤干细胞增殖和凋亡的影响。方法无血清悬浮培养胶质瘤干细胞,RT-PCR检测CD133的表达,荧光染色检测胶质瘤干细胞分化后细胞巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白的表达。10Gy伽玛射线处理胶质瘤干细胞、U87细胞48 h后显微镜下观察细胞存活数;15 Gy伽玛射线处理胶质瘤干细胞810 h后免疫荧光染色检测5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞;流式细胞仪检测10、15 Gy伽玛射线处理前后胶质瘤干细胞凋亡的变化。结果胶质瘤干细胞呈球形悬浮生长于培养基中,表达CD133和nestin,能够分化为星形胶质细胞和神经元,说明获得的胶质瘤干细胞具有分化能力。10 Gy伽玛射线处理同等密度的胶质瘤干细胞、U87细胞后U87细胞大量死亡,胶质瘤干细胞大部分存活,比较差异有统计学意义(86+3vs 22+2,P<0.05);15 Gy伽玛射线照射后,胶质瘤干细胞的BrdU阳性细胞率低于照射前,差异具有统计学意义[(35±0.8)%vs(22+0.8)%,P<0.05)];用不同剂量的伽玛射线处理后细胞均发生凋亡,但凋亡率很低,高剂量组凋亡率(15 Gy,0.312+0.011)高于低剂量组(10 Gy,0.112+0.01 4),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在无血清培养基培养条件下,人体胶质瘤组织能够培养出胶质瘤干细胞。伽玛刀治疗能够抑制胶质瘤干细胞的增殖,引起其凋亡,并呈剂量相关性。和胶质瘤细胞相比较,胶质瘤干细胞对伽玛刀不敏感,存在放疗抵抗性。

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