高同型半胱氨酸通过Notch1/Hes1信号通路促进HT22细胞自噬和凋亡

作者：张竞文; 何静; 米晓娟; 许贤瑞; 田英; 燕茹^*

来源：南方医科大学学报, 2023, 43(10): 1796-1803.

• 同型半胱氨酸
• 细胞
• 自噬
• 凋亡
• Notch1
• HES1
• Jagged1

目的 探讨高同型半胱氨酸（HHcy）引起神经细胞损伤的相关机制。方法 采用HT22细胞，分为空白对照组（简称0组），高同型半胱氨酸组（Hcy 100μmol/L，简称100组），高同型半胱氨酸维生素B干预组（Hcy 100μmol/L+叶酸+维生素B12，简称100+fv组），空白对照+叶酸+维生素B12组（简称0+fv组）。通过透射电镜和流式细胞术观察自噬及凋亡；Western blotting、Real-time PCR检测Hes1、Hes5、Notch1、Jagged1、Bcl-2、Bax、P62、LC3II/LC3I表达。结果 培养48 h后，高同型半胱氨酸组（100组）中死亡细胞明显增加（P<0.05）。流式细胞检测结果显示，高同型半胱氨酸组凋亡细胞比例均高于0组、100+fv组和0+fv组（P<0.05）。透射电镜观察显示，在高同型半胱氨酸组，线粒体肿胀、空泡化，自噬体增加。Western blot显示，在高同型半胱氨酸组，Bax/Bcl-2比值明显高于对照组和100+fv组（P<0.05）;P62相对值明显低于对照组（P<0.05）;LC3II/LC3I比值明显高于对照组和100+fv组（P<0.05）;HES1、HES5、Notch1和Jagged1蛋白表达明显低于对照组（P<0.05）。Real-time PCR检测结果显示，在高同型半胱氨酸组，LC3 m RNA、Beclin1 mRNA明显高于对照组和100+fv组，P62mRNA明显低于100+fv组（P<0.05）;Hes1mRNA和Hes5 mRNA明显低于对照组、100+fv组和0+fv组（P<0.05）。Hes1 siRNA干扰后，Hes1和Jagged1表达量明显低于对照组，Notch1表达量无显著性差异（P>0.05）。结论 高同型半胱氨酸能诱导HT22细胞自噬和凋亡增加，伴有Hes1和Jagged1基因表达下调。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 基础医学院; 宁夏医科大学