日本血吸虫表膜特异结合肽重组质粒ZLW/pEGFP-C2体外转染日本血吸虫童虫的研究

作者：刘彦; 曾庆仁; 杨胜辉; 魏琦; 周军; 李立新; 兰玲梅

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2011, (01): 16-20.

• 日本血吸虫
• 脱尾童虫
• 表膜结合肽
• 转染效率
• 抗虫效果 Schistosoma japonicum
• Schistosomulum
• Tegument binding peptide
• Transfection efficiency
• Schistosomicidal effect

目的观察日本血吸虫表膜特异结合肽合成基因(ZLW)构建的ZLW/pEGFP-C2重组质粒体外转染日本血吸虫童虫的效率,了解其抗虫作用。方法用0.75%二甲基亚砜(DMSO)和高浓度质粒浸泡法,使用重组质粒ZLW/pEGFP-C2转染机械转化的日本血吸虫脱尾童虫,以瞬时表达的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因,在倒置荧光镜下观察虫体。抽提转染后培养48h虫体的总RNA和全虫蛋白,分别用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)检测ZLW基因和EGFP基因在虫体内的表达情况。于转染后培养24、48、72和96h,用美蓝染色法鉴别虫体存活情况,并计数。以上试验均设空质粒组...

• 单位
  中南大学湘雅三医院; 湖南中医药大学; 南华大学; 中南大学