基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略

作者：隋少卉; 王京兰; 卢庄; 蔡耘; 张养军; 蔚文峰; 钱小红

来源：色谱, 2008, (02): 195-199.

• 磷酸化
• 位点
• 强阳离子交换色谱
• 富集
• 蛋白质组学 phosphorylation
• sites
• strong cation exchange chromatography(SCX)
• enrichment
• proteomics

为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用。实验结果表明优化后的体系能够在30min内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对提高了磷酸化肽段在质谱仪中的响应强度,重要的是该体系可以对复杂样品进行很好的分离。这说明SCX用于规模化磷酸化肽段富集的策略是可行的。本研究为磷酸化蛋白质组学规模化分析提供了实用技术。

• 单位
  军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 蛋白质组学国家重点实验室; 北京蛋白质组研究中心; 中国人民解放军防化学院