摘要

目的 采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)筛选产KPC型肺炎克雷伯菌(KPC-Kp)的特征峰,建立快速检测KPC-Kp的方法。方法 收集耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)共37株,PCR方法检测常见碳青霉烯酶耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMP和blaOXA-48-like);全基因组测序分析CRKP菌株的相关遗传特性,包括多位点序列分型(MLST)和blaKPC-2基因周围环境;用布鲁克ClinproTools 3.0软件以及Flexanalysis 3.0图谱分析软件筛选出KPC-Kp的特征峰,分析特征峰与KPC-Kp的MLST分型和blaKPC-2基因周围环境的关系。结果 PCR结果显示,35株CRKP携带blaKPC-2基因,2株CRKP携带blaNDM-1基因。MLST分析结果显示,37株CRKP共有5个ST型,其中35株KPC-Kp分为3个ST型,分别是ST11型(28株)、ST252型(5株)、ST111型(2株)。blaKPC-2基因周围环境分析结果显示KPC-Kp共有3种核心结构,包括ISKpn27-blaKPC-2-ISKpn6、IS26-ISKpn27-blaKPC-2-ISKpn6和blaKPC-2-ISKpn6。MALDI-TOF MS筛选获得KPC-Kp的特征峰为(4 521±1)m/z和(4 514±1)m/z,灵敏度分别为34.3%和5.7%。结论 MALDI-TOF MS可检出产KPC型肺炎克雷伯菌的特征峰为(4 521±1)m/z和(4 514±1)m/z,对快速检测KPC-Kp具有临床价值。