GPC3-siRNA真核质粒载体的构建及Huh-7细胞转染

作者：温继育; 邹文俊; 刘忠考; 黎然; 邱志东; 李明意; 缪辉来

来源：广东医学院学报, 2014, 32(02): 143-146.

• GPC3
• 真核质粒
• 转染
• Huh-7细胞

目的探讨GPC3-siRNA真核质粒载体构建并转染Huh-7细胞的可行性。方法构建真核质粒载体pcDNA3.1+GPC3和GPC3-siRNA-1633,采用脂质体法瞬时转染至Huh-7细胞中。MTT法检测转染后Huh-7细胞的细胞活性,荧光定量PCR、Western blot分别检测GPC3 mRNA和蛋白表达。结果 GPC3-siRNA-1633基因和GPC3真核质粒载体转染Huh-7细胞后细胞存活率高,转染GPC3-siRNA-1633的Huh-7细胞出现GPC3 mRNA和蛋白表达下调。结论 GPC3-siRNA-1633可成功转染至Huh-7细胞,并抑制GPC3表达。

• 单位
  广东医学院附属医院