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摘要
禽流感病毒 H9 亚型（AIV-H9）、鹅圆环病毒（GoCV）和番鸭呼肠孤病毒（MDRV）是水禽常见病原，常发生混合感染且易导致水禽的免疫抑制性疾病。 本研究针对 AIV-H9、GoCV 和 MDRV 的基因序列，分别设计特异性引物，通过优化多重 PCR 的反应条件，建立了这 3 种病毒的多重 PCR 检测方法，并进行特异性、灵敏度和可重复性验证。 结果显示，建立的三重 PCR 检测方法能特异性扩增 AIV-H9、GoCV 和 MDRV的目的片段，与新型鹅星状病毒、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽腺病毒 4 型无交叉反应；最低检出浓度分别为2.93×10～4copies/ μL、2.5×10～2copies/ μL、3.0×10～6copies/ μL；利用该方法对 30 份临床样品进行检测，MDRV检出率为 6.7%,GoCV 和 AIV-H9 的检出率较高，分别为 36.7%和 26.7%。 三重 PCR 与单重 PCR 的符合率为 100%。 结果表明，该三重 PCR 检测方法特异、灵敏、稳定性好，能够用于这 3 种病毒的流行病学调查和临床检测。
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