摘要

目的 探讨川续断皂苷Ⅵ(asperosaponinⅥ,ASAⅥ)对人颌骨骨髓间充质干细胞(human jaw bone marrow mesenchymal stem cells, hjBMSCs)成骨分化的影响。方法 流式鉴定提取的hjBMSCs表面的特异性抗原;CCK8检测1×10~(-4)、1×10~(-5)、1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8) mol/L的ASAⅥ药物溶液对hjBMSCs增殖的影响;用BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色、茜素红染色(alizarin red stain, ARS)及免疫印迹分析(western-blot, WB)验证ASAⅥ促进hjBMSCs成骨分化作用的同时,确定ASAⅥ促进hjBMSCs成骨分化合适浓度。用实时定量荧光PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)进一步探索,在mRNA水平,ASAⅥ对hjBMSCs成骨分化的影响。结果 实验结果表明,1×10~(-4) mol/L的ASAⅥ对hjBMSCs有明显的毒性作用(P<0.01),1×10~(-8)~1×10~(-5) mol/L对细胞增殖无明显毒性作用。与对照组相比,1×10~(-5) mol/L、1×10~(-6) mol/L ASAⅥ组的碱性磷酸酯酶、钙结节沉淀、成骨分化特异性蛋白表达量均明显升高。与对照组相比,1×10~(-5) mol/L、1×10~(-6) mol/L组的Runx2、OCN和COL-Ⅰ在mRNA水平的表达均明显上升(P<0.01),且前者略显优势。结论 1×10~(-5)、1×10~(-6) mol/L的ASAⅥ均能较好促进hjBMSCs成骨分化,且1×10~(-5) mol/L略显优势。

  • 单位
    南京医科大学附属口腔医院; 中国人民解放军东部战区总医院

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