铜绿假单胞菌噬菌体的分离筛选和体内外抗菌活性研究

作者:陈全顺; 陈向东*; 汪辉; 杨景; 强俊磊; 田宇航; 李弘远; 蒲培熙
来源:药学与临床研究, 2021, 29(04): 241-245.
DOI:10.13664/j.cnki.pcr.2021.04.001

摘要

目的:分离筛选针对铜绿假单胞菌的强裂解性噬菌体,并研究其生物学特性和体内外抗菌活性。方法:药敏纸片法筛选铜绿假单胞菌的耐药菌株,以此为宿主菌,采用双层平板法和斑点法分离筛选噬菌体并分析其生物学特性,透射电镜观察噬菌体的微观形态,检测噬菌体和细菌共培养液的OD600值分析体外抗菌活性,建立小鼠全身感染模型评估噬菌体疗效。结果:分离获得3株铜绿假单胞菌噬菌体,从中筛选出一株宽谱的强裂解活性噬菌体PPa24。PPa24属于长尾噬菌体科,其在55℃以下、pH6~10条件下活性稳定,最佳感染复数为0.1,一步生长曲线显示PPa24感染宿主菌的潜伏期为20 min、裂解期为70 min、裂解量为62 PFU·cell-1。噬菌体PPa24可以有效降低细菌培养物的OD600值,用来治疗小鼠全身感染可显著降低血液载菌量(P<0.01),并使存活率提高至75%(P<0.001)。结论:筛选得到的噬菌体PPa24在抗击铜绿假单胞菌感染方面初步显示了良好的体内外活性,可能成为治疗铜绿假单胞菌感染的潜在抗菌剂

全文