基于PI3K/AKT/mTOR信号通路的制首乌大黄素有效成分抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化

作者：张磊; 田维毅; 王和生^*; 赖陈岑; 李妹娟; 夏丽; 冷传龙

来源：中国老年学杂志, 2021, 41(13): 2769-2773.

• 动脉粥样硬化
• 何首乌
• 大黄素
• mTOR信号通路

目的探讨制首乌有效成分大黄素在抗动脉粥样硬化(AS)方面的作用机制,以ApoE-/-小鼠为研究对象,观察大黄素对AS模型中mTOR信号通路的调控作用。方法 72只成年雄性ApoE-/-小鼠随机分成6组:模型组、高、中、低剂量组、阳性对照组和大黄素中剂量+雷帕霉素(联合用药)组,每组12只。所有小鼠用高脂饲料饲养9 w,并每隔1 d腹部皮下注射脂多糖(LPS)25μg/只。成模后停止LPS注射,并随机处死1只小鼠,进行主动脉油红O染色,确定成模。从第10周起,基于高脂饮食,高、中、低剂量组分别按照40、20、10 mg/kg灌服大黄素,阳性对照组按200 mg/kg灌服血脂康,联合用药组给予20 mg/kg大黄素及腹部皮下注射雷帕霉素1 mg/kg。所有药物体积为0.5 ml,持续给药6 w后取材。检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的浓度。取小鼠主动脉近心端2 cm进行切片苏木素-伊红(HE)染色,并在显微镜下进行病理观察。用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心肌组织中磷酸肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) mRNA的表达。Western印迹检测心肌组织中mTOR、p-mTOR、PI3K、AKT蛋白表达。结果给药各组TC、TG、LDL-C水平均明显降低(均P<0.05)。除低剂量组外其余给药组HDL-C水平均明显高于模型组(均P<0.05)。模型组内膜明显增厚,可见大的脂质核心,斑块纤维帽变薄并伴有破裂;高剂量组内膜稍有增厚;中剂量组内膜增厚,稍有破裂,但细胞排列整体有序;低剂量组内膜变薄,有脂质堆积,见玻璃样变形成;阳性对照组内膜增厚,斑块纤维帽较薄;联合用药组内膜稍增厚,未见脂质。与模型组比较,高、中剂量组、阳性对照组和联合用药组mTOR mRNA水平明显降低(P<0.05);高、中、低剂量组和联合用药组PI3K mRNA水平明显降低(P<0.05)。高、中剂量组、联合用药组和阳性对照组AKT mRNA水平明显降低(均P<0.05)。与模型组比较,高、中剂量组、联合用药组PI3K蛋白表达水平明显降低(P<0.05);高、中剂量组AKT蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。高、中、低剂量组、阳性对照组和联合用药组mTOR蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。高、中、低剂量组和联合用药组p-mTOR蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论一定剂量制首乌大黄素对ApoE-/-小鼠AS模型病变有显著影响,其机制可能与抑制mTOR信号通路有关。

• 单位
  中心实验室; 贵州中医药大学