变异链球菌LuxS缺陷株甲基循环通路的恢复构建

作者：王玉霞; 高丽; 江文欣; 马瑞; 唐子圣; 朱彩莲; 何智妍; 黄正蔚

来源：上海口腔医学, 2014, 23(04): 385-390.

• 变异链球菌
• 生物膜
• 密度感应
• LuxS
• SahH

目的:以变异链球菌LuxS缺陷株为模型,构建其密度感应缺陷的甲基循环恢复株。方法:以LuxS为阳性表达对照,通过在变异链球菌LuxS缺陷株中异源表达SahH,实现其代谢通路的恢复构建。通过Western印迹、反转录PCR和信号分子AI-2分泌检测,验证目的蛋白的表达。采用SAS8.0软件包对数据进行统计学分析。结果:Western印迹检测2种蛋白在大肠杆菌中均得到正确表达,验证了克隆载体的正常表达能力;反转录PCR验证了变异链球菌LuxS缺陷株中luxS及sahH mRNA的存在;发光实验证实LuxS阳性表达对照株AI-2的分泌能力恢复。结论:成功构建变异链球菌LuxS缺陷的代谢恢复株,为探讨LuxS的调控机制提供了分子生物学工具及实验对照。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院