摘要
目的:探究苦参素复合长春新碱对HCT-8/VCR细胞耐药性的影响及其机制。方法:HCT-8/VCR体外培养,分为空白组、苦参素单药组,长春新碱单药组、苦参素和长春新碱联合组,每组6个复孔。CCK-8法检测各组HCT-8/VCR细胞的耐药性; MDC法检测细胞内自噬小泡的变化; ELISA法检测IL-6的含量; Western blot检测自噬相关基因与免疫因子TLR4蛋白的表达水平。结果:苦参素复合长春新碱可降低HCT-8/VCR细胞的耐药性,逆转倍数为3.23;与空白组比较,苦参素组和联合组自噬体含量降低、IL-6含量也明显降低(P<0.01),长春新碱组自噬体含量升高,IL-6含量也明显升高(P<0.01);联合组与苦参素组比较,自噬体含量升高,而IL-6含量降低(P<0.01); Western blot实验表明,与空白组比较,苦参素组P62的表达降低(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、TLR4均升高(P<0.05),长春新碱组和联合组P62的表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、TLR4均降低(P<0.05);联合组与长春新碱组比较,P62的表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、TLR4均降低(P<0.05)。结论:苦参素与长春新碱联合可显著降低HCT-8/VCR的耐药性,其机制与抑制自噬活动和TLR4信号活化有关。
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