囊性肾病囊液周围免疫微环境的基础研究

作者：岳栋; 郑苗; 李忠海; 周平慧; 董凤云^*

来源：国际泌尿系统杂志, 2023, 43(05).

• 上皮细胞
• 囊性肾病
• 免疫微环境
• 细胞增殖
• 细胞衰老

目的探讨囊性肾病(CKD)囊液中的炎症因子成分以及对周围免疫微环境的影响。方法选取2021年1月至2021年6月在本院诊断为多囊肾或肾囊肿并行后腹腔镜下肾囊肿去顶减压术的20例患者的囊壁组织作为实验组, 同期体检的20例患者的囊壁组织作为对照组。分别采用流式多因子检测实验组的囊液成分及对照组血清, 细胞增殖检测实验(CCK8)、克隆形成实验检测囊液对肾小管上皮细胞(HK2)增殖的影响, β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老, 蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测可能的信号通路, 免疫组织化学法检测巨噬细胞标志物(CD68、CD163)及纤维化标志物(α-SMA)在囊壁组织中的表达情况, Transwell实验检测巨噬细胞的迁移。结果实验组的IL-2、IL-6、IL-10较对照组明显升高, 差异均有统计学意义(均P<0.0 05)。CCK8实验结果显示实验组在囊液刺激3 d后的细胞增殖较对照组明显增加, 差异有统计学意义(P=0.016)。克隆形成实验结果显示实验组在囊液刺激2周后的细胞克隆形成数较对照组增多, 差异有统计学意义(P=0.037)。细胞衰老检测结果显示实验组在囊液刺激1周后的β-半乳糖苷酶阳性的衰老细胞百分率高于对照组, 差异有统计学意义(P=0.004)。Western blot法检测结果显示, 实验组在囊液刺激后GSK-3β表达量增高, β-catenin表达量降低。Transwell迁移实验结果显示与对照组比较, 实验组的囊液能够明显趋化巨噬细胞, 差异有统计学意义(P<0.0 05)。结论巨噬细胞参与CKD囊液形成、细胞老化、纤维化, 为下一步免疫治疗提供理论基础。

• 单位
  济宁医学院附属医院