层析技术制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒F(ab’)2

作者：邱泊宁; 王翀; 赵永坤; 胡星星; 王化磊; 曹增国; 盖微微; 崔健男; 闫飞虎; 杨松涛; 夏咸柱

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(04): 417-428.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001716

• 中东呼吸综合征
• 冠状病毒
• 病毒样颗粒
• 层析
• 免疫球蛋白

目的采用层析技术制备高纯度的马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrom coronavirus,MERS-CoV)F(ab’)2。方法以MERS-CoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,采用亲和层析技术提取血清IgG,经胃蛋白酶酶切后,通过阴离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析分别对F(ab’)2进行纯化;以MERS假病毒检测所制备的IgG与F(ab’)2中和活性。结果凝胶过滤层析实现了F(ab’)2的高纯度分离,最终制备的F(ab’)2收率约70%,纯度为93%以上,具有良好的中和活性,其半数抑制浓度(IC50)为5.13μg/ml。结论制备了高纯度马抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2,为人用抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)2生产工艺的建立奠定了基础。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院; 军事医学科学院军事兽医研究所; 东北农业大学; 吉林大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 吉林农业大学; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心