摘要
从湖北武汉地区虾壳堆积土壤中筛选得到一株分泌胞外几丁质酶菌株ZWW8,通过16S rDNA序列比对发现其属于无色杆菌属;通过碳源、氮源、温度、培养基pH、培养时间的单因素优化实验获得ZWW8菌株的最优发酵条件,该菌株在添加0.5%几丁质胶体,0.5% NH4Cl,初始pH 7.0的培养基中,于37℃培养2 d后胞外上清酶活力可达到33.9 U/L,是优化前酶活力的8倍;通过检测ZWW8菌株分泌胞外几丁质酶的酶学性质发现,其最适反应pH为5,最适反应温度为50℃。Ni2+和Ca2+能提高几丁质酶活性,而Hg2+、Cu2+和Zn2+能明显抑制酶活。此外,几丁质酶还能在高盐条件维持活性和稳定性,并特异性结合几丁质。通过几丁质亲和层析纯化的胞外几丁质酶,在透析除去尿素后仍然具有活性。ZWW8菌株的几丁质酶具有独特的酶学特性,使其能作为高效稳定的生物催化剂,为实现在工业、农业和医学方面的应用潜能,以及几丁质资源的开发和利用奠定基础。
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单位湖北第二师范学院; 生命科学学院