腺病毒载体介导的PTEN基因对黑色素瘤SK-MEL-3细胞化疗敏感性的影响

作者：黄辉云; 沈二栋^*; 唐四清; 粟钰淇

来源：肿瘤药学, 2019, 9(03): 387-394.

• 腺病毒
• PTEN
• 黑素瘤SK-MEL-3细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 细胞周期

目的探讨腺病毒载体介导的PTEN基因对黑色素瘤SK-MEL-3细胞化疗敏感性的影响。方法以pcDNA3.0-PTEN重组质粒为模板,加入PTEN引物,构建重组腺病毒载体PTEN(Ad-PTEN),并用其感染QBI-293A细胞,进行病毒扩增和效价测定。将SK-MEL-3细胞分为对照组(PBS组)、空载体腺病毒组(ADDP处理组)、Ad-PTEN基因治疗组(Ad-PTEN处理组)、顺铂对照组(DDP处理组)、Ad-PTEN+DDP联合处理组。采用RT-PCR和Western blot法检测PTEN、Bax、Bcl-2、P21、P53和Caspase-3的表达水平。分别用划痕实验、侵袭实验、MTT法、流式细胞仪检测各组细胞的迁移、侵袭能力及生长、凋亡情况。结果本研究成功构建了Ad-PTEN,且感染QBI-293细胞后可进行增殖,病毒效价为108 pfu·mL-1。与PBS处理组和ADDP处理组比较,Ad-PTEN处理组、DDP处理组、Ad-PTEN+DDP联合处理组细胞活力减弱,凋亡率上升,Bax、P21、P53及Caspase-3的转录和表达水平上调,Bcl-2下调,差异均具有统计学意义(P<0.0001)。Ad-PTEN+DDP联合处理组与Ad-PTEN处理组、DDP处理组比较,细胞活力减弱,凋亡率上升,Bax、P21、P53及Caspase-3的转录和表达水平上调,Bcl-2下调,差异均具有统计学意义(P<0.0001)。结论 Ad-PTEN可抑制SK-MEL-3细胞增殖并诱导其凋亡,呈现明显的抑癌作用;Ad-PTEN与DDP联合使用对SK-MEL-3细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用显著优于单用Ad-PTEN或DDP,具有化疗增敏作用。

• 单位
  岳阳市一人民医院