新型酪氨酸激酶抑制剂B-1对U251胶质瘤细胞存活和凋亡的影响

作者：杨媛媛; 王康敏; 张士坤; 宋锦文; 檀英霞; 李素波; 高红伟; 季守平; 宫锋

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2016, 30(08): 833-838.

• 酪氨酸激酶抑制剂
• B-1
• 细胞,U251
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨GNF-5837修饰改造而合成的神经生长因子受体酪氨酸激酶A(Trk A)抑制剂B-1对胶质瘤U251细胞存活和凋亡的影响,为恶性胶质瘤治疗提供新的思路。方法 B-1和GNF-5837 1.0×10-111.0×103mol·L-1分别与Trk A激酶作用1 h,ADP-Glo?激酶检测法测定Trk A活性;MTT法检测胶质瘤U251细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率;直接计数法检测胶质瘤U251细胞集落形成;流式细胞仪检测胶质瘤U251细胞凋亡率;Western蛋白印迹法检测BAD、BCL-2和胱天蛋白酶原3蛋白表达水平。结果B-1和GNF-5837对Trk A活性的抑制作用相近,IC50值分别为4.7±1.0和(4.3±1.7)nmol·L-1;B-1可浓度依赖性抑制胶质瘤U251细胞的存活(r=0.968,P<0.01),14μmol·L-1时存活率降到50%;且B-1对HUVEC的IC50约为31μmol·L-1,高于GNF-5837的IC5013μmol·L-1;B-1浓度依赖性抑制U251细胞集落形成能力(r=0.959,P<0.05);与细胞对照组相比,B-1 1040μmol·L-1作用72 h后U251细胞的凋亡率升高(P<0.01);U251细胞内促凋亡蛋白BAD水平显著上升(P<0.01),而抗凋亡蛋白BCL-2和胱天蛋白酶原3表达水平降低(P<0.01)。结论 B-1能抑制胶质瘤U251细胞存活,其机制与B-1通过抑制Trk活性及下游信号通路,降低抗凋亡蛋白水平的同时增加促凋亡蛋白水平,最终诱导其凋亡有关。

• 单位
  军事医学科学院; 成都知普莱生物医药科技有限公司