摘要
目的探讨血凝酶-海藻酸钙复合微球对小鼠3T3成纤维细胞活力及凋亡的影响。方法采用物理和化学结合的方法制备血凝酶-海藻酸钙复合微球。将细胞分为阴性对照组(正常培养基)、微球组(血凝酶-海藻酸钙复合微球浸提液)、阳性对照组(含有0.64%苯酚的DMEM培养基或含有10μmol/L VP-16的DMEM培养基)。光学显微镜观察各组24 h后细胞的生长状态。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测24 h和48 h各组细胞活力。采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白[剪切型的半胱天冬酶-3(cleaved caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2关联X蛋白(Bax)]的表达情况。结果显微镜下观察结果发现,微球呈圆形,大小形态均一,直径328.0~374.2μm,平均直径(350.0±24.9)μm。与阴性对照组比较,微球组细胞活力无明显变化(P>0.05),阳性对照组细胞活力显著下降(P<0.05)。与阴性对照组比较,微球组凋亡相关蛋白cleaved caspase 3、Bax和Bcl-2无明显变化(P>0.05);阳性对照组细胞凋亡蛋白cleaved caspase 3和Bax表达明显增加(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降(P<0.05)。结论血凝酶-海藻酸钙复合微球不影响小鼠3T3成纤维细胞活力和凋亡,具有良好的细胞相容性。