携带变形链球菌表面蛋白、葡聚糖结合蛋白及信号肽基因的真核表达质粒的构建

作者：柴巧学; 刘建国; 杨德琴

来源：广东牙病防治, 2011, (04): 181-185.

• 变形链球菌
• 表面蛋白抗原
• 葡聚糖结合蛋白
• 真核表达质粒
• 基因疫苗 Streptococcus mutans
• Surface protein antigen
• Glucan-binding protein
• Eukaryotic expression vector
• Gene vaccine

目的通过构建带有变形链球菌表面蛋白SpaP的P区、葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区(glucan bind-ing domain,GBD)及一段信号肽基因的嵌和体真核表达质粒pSSG,为基因疫苗的制备提供实验基础。方法通过PCR扩增,获得分别编码SpaP的P区和GBD的两个基因片段sp和gg,以及人白介素2信号肽基因(signal)。将它们分别定向插入pMD20-T克隆载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆,初步鉴定后测序。将获得的3个基因片段分别双酶切,胶回收纯化后将同样进行双酶切的pVAX1质粒在T4 DNA连接酶作用下进行连接反应,获得真核表达质粒pSSG,并转化DH5α,提取纯化...

• 单位
  遵义医科大学; 南方医科大学; 广东省口腔医院