摘要
目的 :探究钛表面纳米形貌介导的巨噬细胞极化对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响。方法:选用机械加工的纯钛片作为对照组(control-Ti组);将180℃下水热反应12 h后的纯钛片作为纳米组(nm-Ti组)。通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和水接触角测试其表面性能,细胞学实验检测其生物相容性,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测RAW264.7巨噬细胞极化的相关基因和BMSCs成骨相关基因的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞炎症相关因子的分泌水平。结果:经过水热处理后,钛片表面形成纳米形貌,且具有良好的亲水性。相比于control-Ti组,nm-Ti组表面细胞增殖和黏附更为活跃。ELISA结果显示,随时间增加,nm-Ti组分泌白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平显著升高(P<0.01)。M2极化标志物Arg-1和M1极化标志物iNOS均随时间递增而增多,以Arg-1增多为主,经白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)刺激后,nm-Ti组的Arg-1表达显著增多(P<0.01),iNOS表达降低(P<0.05)。巨噬细胞条件培养液培养BMSCs后,nm-Ti组成骨相关基因骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量比正常培养时减少,IL-4刺激培养后,BMP-2和ALP表达均有所升高。结论:钛表面纳米形貌能够影响巨噬细胞极化方向,进而影响BMSCs的成骨分化能力。
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单位同济大学附属口腔医院; 同济大学