人牙龈间充质干细胞外囊泡调控M1型巨噬细胞极化的研究

作者：石文博; 段佳伟; 牛欣欣; 张远成; 车惠; 张少冰; 石铭; 曾今诚^*

来源：微生物学免疫学进展, 2023, 51(06): 1-7.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2023.06.001

• 人牙龈间充质干细胞
• 外囊泡
• 巨噬细胞
• 极化
• 腺苷
• 一氧化氮合酶
• IL-1β
• 精氨酸酶1

目的 分析人牙龈间充质干细胞外囊泡(human gingival mesenchymal stem cell extracellular vesicle, CMU-Egm-9-EVs)调控M1型巨噬细胞(macrophage)极化(polarization)的表型及机制。方法 通过佛波酯(PMA,100 nmol/L)作用人单核细胞系THP-1构建M0极化模型，设立空白对照组、EVs-PKH26组、CMU-Egm-9-Evs浓度递增组(20、40、80、160、320μg/mL)、CMU-Egm-9-Evs组(10μg/mL)、LPS组(100 ng/mL)与共同作用组(CMU-Egm-9-Evs、10μg/mL+100 ng/mL LPS、100 ng/mL),作用48 h后，激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬外囊泡；ELISA检测细胞因子TNF-α含量；Western blot检测巨噬细胞炎症相关蛋白iNOS、IL-6、ARG-1等表达；RT-qPCR检测TNF-α、IL-1β、iNOS基因表达。结果 巨噬细胞可吞噬CMU-Egm-9-Evs。与空白对照组相比，高浓度CMU-Egm-9-EVs作用M0型巨噬细胞后，iNOS表达明显上调，差异有统计学意义(P=0.001,P<0.05);巨噬细胞分泌TNF-α明显增多，差异有统计学意义(P=0.013 8,P<0.05);LPS和低浓度CMU-Egm-9-EVs共同作用于M0型巨噬细胞后，与LPS单独作用组相比，TNF-α分泌减少，差异有统计学意义(P=0.001 2,P<0.05);M2型巨噬细胞ARG-1蛋白表达上调，差异有统计学意义(P<0.000 1);M1型巨噬细胞相关基因mRNA IL-1β、iNOS、TNF-α表达均下调，差异均有统计学意义(P=0.007 9,P=0.000 5,P=0.000 1)。结论 CMU-Egm-9-EVs可被巨噬细胞吞噬，高浓度作用于巨噬细胞时，可明显促进其向M1型巨噬细胞极化；在LPS炎症刺激下，低浓度CMU-Egm-9-EVs可抑制其向M1巨噬细胞极化。

• 单位
  广东医科大学