摘要
目的探讨棕榈酸(PA)激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白磷酸酶2C (PP2C)对内皮一氧化氮合酶第1177位丝氨酸(eNOS Ser1177)磷酸化的调控作用。方法 HUVEC随机分为对照组、 PA组、特异性PP2C抑制剂血根碱(San)联合PA组以及转染PP2Cα特异性小干扰RNA(siRNA)组。采用Western blot法检测eNOS总蛋白、 eNOS Ser1177磷酸化水平和PP2Cα蛋白水平,二氨基荧光素-FM二乙酸酯(DAF-FM DA)负载法检测细胞内一氧化氮(NO)含量,免疫共沉淀法观察eNOS与PP2C之间的共定位关系。结果与对照组相比, PA处理组eNOS Ser1177磷酸化水平及NO含量均降低, San预处理组可逆转以上变化。敲低PP2Cα蛋白表达水平后, eNOS Ser1177磷酸化水平增加。eNOS与PP2C在细胞内共定位。结论 PA通过激活HUVEC的PP2C引起eNOS Ser1177磷酸化水平降低。
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单位基础医学院; 贵州医科大学