基于牛白血病病毒gp51蛋白建立间接ELISA检测方法

作者：曹丙蕾; 刘敏; 张群; 王飞; 王群

来源：中国口岸科学技术, 2021, 3(11): 4-10.

• 牛白血病病毒
• 牛地方流行性白血病
• gp51蛋白
• 表达
• ELISA

本研究通过扩增gp51蛋白基因,与pET-32a连接构建重组表达载体,经表达、纯化获得重组gp51蛋白。利用该蛋白为包被抗原,通过优化反应条件,建立牛血清中BLV抗体的间接ELISA方法。SDS-PAGE鉴定表明,成功表达纯化了预期大小为47 kDa的重组gp51蛋白。Western blot鉴定表示该蛋白具有较好的抗原性,与无关血清样本无反应原性。建立的间接ELISA方法中抗原的最佳包被量为200 ng/孔,待检牛血清的最佳稀释比例为1:100,结果表明,该方法具有较好的敏感性和特异性,重复性高,与进口ELISA试剂盒的结果符合率达97.8%以上,具有较好的应用前景。