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摘要
目的 探讨四次跨膜蛋白1(Tspan1)过表达对奥沙利铂（OXA）诱导的人结直肠癌细胞系HCT116细胞凋亡的影响并分析其可能作用机制。方法 将Tspan1过表达质粒及其阴性对照空载质粒分别转染至HCT116细胞中，q RT-PCR和Western blot法检测胞中Tspan1 m RNA及其蛋白表达水平。采用14.15μg/mL OXA或联合5 mmol/L自噬抑制剂3-MA干预转染后HCT116细胞，MTT检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡水平；免疫荧光检测细胞中LC-3B蛋白表达情况；Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白LC-3、Beclin1和p62蛋白表达水平。结果 Tspan1过表达可显著上调HCT116细胞中Tspan1mRNA和蛋白表达水平，降低HCT116细胞对OXA的敏感性，抑制OXA诱导的HCT116细胞凋亡，并增强细胞中LC3B蛋白荧光强度，上调细胞中LC-3II/LC-3I比值及Beclin1蛋白表达水平，下调p62蛋白表达水平。然而，联合3-MA处理可逆转Tspan1过表达对OXA诱导HCT116细胞凋亡的抑制作用，提高细胞对OXA的敏感性。结论 Tspan1过表达可拮抗OXA诱导的HCT116细胞凋亡，其机制可能是通过诱导细胞自噬来实现的。
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单位武汉市第三医院
