温经汤加味对EM肾虚血瘀证大鼠局部微环境Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin的影响

作者：崔轶凡^*; 孙瑞英; 王志平; 曹娟

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(11): 42-51.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211006

• 子宫内膜异位症(EM)
• 肾虚血瘀证
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)
• 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)
• 上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)
• 神经钙黏蛋白(N-cadherin)
• 温经汤加味

目的:探讨温经汤加味对子宫内膜异位症(EM)肾虚血瘀证大鼠的干预作用及其机制研究。方法:SPF级雌性未孕大鼠随机选出正常组,其余大鼠采用"冰水浸泡+皮下注射盐酸肾上腺素法"进行肾虚血瘀证造模,造模结束后,仅开腹不进行内膜移植大鼠,设为假手术组,其余大鼠以自体内膜移植法进行EM造模,EM肾虚血瘀证造模成功大鼠随机分为阳性药组及温经汤加味(中药)低、中、高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以5,10,20 g·kg-1灌胃,每日给药1次,连续4周;阳性药选取达那唑63 mg·kg-1灌胃,每日给药1次,连续4周。4周后,取各组大鼠内膜组织(异位、在位)进行苏木素-伊红(HE)染色,观察其组织病理学变化;免疫组化(IHC)法、蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8),基质金属蛋白酶-9(MMP-9),上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)及神经钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin mRNA表达。结果:经IHC法和Western blot法,与假手术组比较,EM肾虚血瘀证模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.01),Caspase-8,E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,达那唑组、中药低、中、高剂量组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin蛋白明显降低(P<0.05,P<0.01),Caspase-8,E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。经Real-time PCR法检测,与假手术组大鼠比较,模型组大鼠在位、异位内膜组织中MMP-9,N-cadherin mRNA表达显著升高(P<0.01),Caspase-8,E-cadherin mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组大鼠在位内膜比较,达那唑组、中药高、中剂量组在位、异位内膜组织MMP-9,N-cadherin mRNA表达明显降低,Caspase-8,E-cadherin mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:温经汤加味能够通过调节Caspase-8,MMP-9,E-cadherin,N-cadherin等因子水平异常表达,改善EM肾虚血瘀证大鼠免疫抑制、阻断微血管新生,从而起到治疗EM的作用;以上微观指标的变化有望成为体现疾病(EM),证候(肾虚血瘀证)及病理机制(免疫抑制、微血管新生)的重要标志物。

• 单位
  山西中医药大学