三步法制备级纯化抗CD20(Fab′)_2

作者：王金宏; 杨铭; 范冬梅; 许元生; 熊冬生; 杨纯正

来源：中国医学科学院学报, 2008, (05): 622-625.

• 抗CD20(Fab′)2
• 三步法纯化
• 高效液相色谱分析 antiCD20(Fab′)2
• three-step purification
• high-performance liquid chromatograph

目的在小规模蛋白纯化系统AKTA prime上建立制备级纯化抗CD20(Fab′)2的方法。方法将通过高渗溶液提取的周质腔蛋白抗CD20(Fab′)2依次经过离子柱、疏水柱和亲和柱纯化,采用蛋白电泳和高效液相色谱法分析检测其分离效果及纯度,同时测定其与Raji细胞的结合活性。结果在该纯化条件下一次可获得8mg纯度为96.678%的抗CD20(Fab′)2,其与CD20+Raji细胞的结合活性与采用亲和柱联合分子筛柱得到的抗体活性基本一致。结论三步法制备级纯化抗CD20(Fab′)2操作简单,能获得制备级高纯度抗CD20(Fab′)2。

• 单位
  实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院北京协和医学院