DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统的建立

作者：孙宏钰; 蔡贵庆; 陆惠玲; 刘超; 陈丽娴; 李向阳; 伍新尧

来源：法医学杂志, 2005, (04): 27-32.

DOI：10.3969/j.issn.1004-5619.2005.04.009

• 线粒体DNA(mtDNA)
• 变性高效液相色谱(DHPLC)
• 多态性
• 异质性 mitochondrial DNA (mtDNA)
• denaturing high performance liquid chromatography (DHPLC)
• polymorphism
• heteroplasmy

目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统。方法mtDNA控制区序列(包括HVⅠ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析。对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等)进行优化。对100个不同类型差异序列的组合配对以检验该方法的检测效力。结果10组序列相同的样本配对DHPLC图谱均只显示1个样品峰。对序列相差1个碱基～7个碱基、插入(/缺失)1个碱基、插入(/缺失)2个碱基等类型的90个扩增片段组合,用DHPLC进行分析,均得到≥2个样本峰的DHPLC图谱,序列差异检出率达100%。该技术可检测的异质性DNA成...

• 单位
  基础医学院; 广州市公安局; 中山大学; 广州市刑事科学技术研究所