摘要

目的:探讨新生SD大鼠心房肌细胞的原代培养及鉴定,并对其中部分步骤进行改良。方法:采用出生1~3 d的SD乳鼠,运用“两步法”提取心房肌细胞,利用心房肌细胞与成纤维细胞贴壁时间不同和Brd U能抑制成纤维细胞繁殖进行心房肌细胞纯化,并运用双色免疫荧光进行鉴定。结果:36 h后镜下可见细胞已经贴壁,并可见少数细胞出现自发搏动,72 h后细胞铺满瓶底90%,经双色免疫荧光鉴定超过95%为心房肌细胞。结论:“两步法”可缩短胰酶消化时间,Ⅱ型胶原酶+BSA联合消化可以更有效地培养出原代心房肌细胞。