非洲猪瘟病毒抗体快速检测试纸条的初步研制

作者：江地科; 邬旭龙; 陈弟诗; 王印^*; 姚学萍; 罗燕; 杨泽晓; 张鹏飞

来源：农业生物技术学报, 2022, 30(01): 185-193.

• 非洲猪瘟病毒(ASFV)
• p72蛋白
• 原核表达
• 胶体金

为建立一种能快速、高效、简便检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)抗体的方法,本研究采用原核表达系统表达ASFV衣壳蛋白(p72)作为捕捉抗原,以纯化的抗ASFV p72蛋白多克隆抗体和兔抗猪IgG分别包被于硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C线)和检测线(T线),优化反应条件,制备胶体金免疫层析试纸条(colloidal gold immunochromatographic test strip, ICTS),用于临床样品检测。结果表明,本研究成功构建pCold-TF-p72重组蛋白,经Western blot和琼脂扩散实验表明,制备的抗p72多克隆抗体具有良好的反应原性与免疫原性;制备的胶体金试纸条与针对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2, PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性;临床样品阳性检出率为55.17%(48/87),商品ELISA试剂盒阳性检出率为59.77%(52/87),两者阳性符合率为92.31%(48/52)。本研究制备的胶体金试纸条为临床ASFV抗体检测及疫病预防具有一定的参考意义。

• 单位
  四川农业大学; 成都农业科技职业学院; 四川省动物疫病预防控制中心