白藜芦醇对炎症所致椎间软骨终板退变中高迁移率蛋白1信号的影响

作者：胡华; 李连泰^*; 刘艳伟; 王书君; 谢双喜; 孙建君

来源：中国修复重建外科杂志, 2022, 36(04): 461-469.

• 白藜芦醇
• 软骨终板
• 退变
• 高迁移率蛋白1
• 信号通路
• 大鼠

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol,RES）对炎症所致椎间软骨终板（cartilage endplate,CEP）退变的作用，以及对高迁移率蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)信号的调控机制。方法 提取3周龄SD大鼠椎间CEP细胞，并采用甲苯胺蓝染色、兔抗大鼠Ⅱ型胶原蛋白细胞免疫荧光染色进行鉴定；采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)筛选RES对椎间CEP细胞的最佳浓度；采用基因芯片分析确定RES对椎间CEP细胞的作用靶点。分别以IL-1β构建炎症所致椎间CEP细胞退变模型和7～8周龄SD大鼠椎间盘退行性病变模型，并以pcDNA3.1-HMGB1(pcDNA3.1)作为RES作用的对照，分别以流式细胞术和TUNEL染色检测椎间CEP细胞和大鼠椎间盘组织中椎间CEP细胞的凋亡率；ELISA试剂盒检测细胞上清液和大鼠血清中IL-10和TNF-α的含量；Western blot检测HMGB1、细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated protein kinase,ERK）、磷酸化ERK(phosphorylated ERK,p-ERK)、 B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B cell lymphoma/leukemia 2gene,Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X,Bax）蛋白表达。结果 经鉴定所提取细胞为大鼠椎间CEP细胞；CCK-8法筛选出以30μmol/L RES处理椎间CEP细胞时活性最高；经基因芯片分析确定HMGB1-ERK信号为RES的作用靶点。细胞实验和动物实验均显示，RES处理均能明显下调椎间CEP细胞的凋亡率，抑制TNF-α的释放，升高IL-10的含量；并明显下调HMGB1、p-ERK和Bax蛋白表达，升高Bcl-2蛋白表达；且pcDNA3.1能部分逆转RES的上述作用，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 RES能明显抑制炎症诱导的椎间CEP细胞凋亡，这与抑制HMGB1的表达有关。

• 单位
  承德医学院附属医院