Hendra病毒一步法Real-time RT-PCR检测方法的建立

作者：曾志磊; 谢鹏; 朱丹; 刘妍汐; 翟红; 彭丹; 陈晓

来源：中国微生态学杂志, 2009, 21(05): 396-398+402.

• Hendra病毒
• Real-time RT-PCR
• 一步法
• Taqman探针
• 快速检测

目的建立针对Hendra病毒N基因的一步法Real-time RT-PCR检测方法,用于Hendra病毒感染样本的快速检测和准确定量。方法针对Hendra病毒的保守基因N设计引物和探针,构建体外转录的RNA片段作为标准品,建立一步法Real-time RT-PCR反应方法并分析敏感性和特异性。结果所设计的引物经Blast检索可以用于检测所有已知的Hendra病毒株。本研究建立的一步法Real-time RT-PCR方法可以特异性检测出Hendra病毒,不与Nipah病毒产生交叉反应。检测灵敏度为2.6×100~2.6×101copies/μl。标准曲线的线性范围为2.6×101~2.6×107copies/μl。结论本研究建立的一步法Real-time RT-PCR方法敏感性和特异性较高,且不易出现污染引起的假阳性结果,适合用于Hendra病毒感染样本的检测。

• 单位
  神经内科; 重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院