人角质化细胞生长因子-2基因的克隆、表达及产物的纯化、鉴定

作者:吴斌文; 段招军; 李武平; 陈勇; 吕宏亮; 衣作安; 张成海; 林菊生; 王家; 侯云德
来源:生物工程学报, 2004, (03): 461-464.
DOI:10.13345/j.cjb.2004.03.032

摘要

用高表达菌株BL 2 1codonpluscompententcells表达重组人角质化细胞生长因子 (hKGF 2 )蛋白并初步纯化和检测其活性。通过RT PCR从流产胎儿肺组织中钓取hKGF 2cDNA ,将其克隆入pBV2 2 0载体质粒。在大肠杆菌BL 2 1codonpluscompentcells中表达hKGF 2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化 ,以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。结果显示 ,hKGF 2蛋白在BL2 1中得到高效表达 ;hKGF 2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖 ,具有显著的促有丝分裂活性。

全文