DENV-2感染的HUVECs与CD4+T细胞相互作用对炎性细胞因子产生的影响

作者：张妮; 左丽; **; 袁静

来源：中国免疫学杂志, 2017, 33(06): 811-817.

• 登革病毒
• 人脐静脉内皮细胞
• +T细胞" name="keyword">CD4+T细胞
• 细胞因子
• 免疫调节

目的:研究原代人脐静脉内皮细胞(Primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染,与CD4+T细胞共培养后,对产生主要炎性细胞因子的相互影响。方法:密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的PBMC,免疫磁珠法阴性分选CD4+T细胞,流式检测细胞表面CD3,CD4分子的表达和CD4+T细胞的纯度。HUVECs经S1P1特异性受体激动剂CYM-5442预处理24 h,加入103TCID50的DENV-2感染后,与CD4+T细胞共培养,Real-time RT-PCR动态检测DENV-2感染HUVECs后病毒NS1基因及IL-6、IL-8的mRNA和CD4+T细胞内IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ的mRNA相对表达量;双抗体夹心ELISA法检测培养上清IL-6、IL-8的表达。结果:流式检测经免疫磁珠阴选的CD4+T细胞纯度为(98.02±0.32)%。DENV-2感染HUVECs后病毒NS1基因相对表达逐渐增加,在24 h(3.03±0.26,P<0.001)达到峰值后下降,而感染DENV-2后与CD4+T细胞共培养组的NS1基因相对表达量低于感染组,且呈下降趋势。感染后IL-6和IL-8表达均有上调,与CD4+T细胞共培养后,IL-6和IL-8在各时间点表达均明显升高(P<0.01)。CYM-5442预处理的共培养感染组中,IL-6在24 h(28.91±2.34,P<0.05)、36 h(19.36±0.1,P<0.05)和72 h(13.84±0.82,P<0.05)显著下降,IL-8表达显著下降。与感染后的HUVECs共培养后CD4+T细胞的IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达均明显升高。结论:DENV-2能感染原代HUVECs;与CD4+T细胞共培养后NS1的表达被抑制。CD4+T细胞不仅能增强被DENV-2感染的HUVECs的活化,同时也能被感染后的HUVECs活化。

• 单位
  贵州医科大学