产抗真菌肽的爱媛类芽孢杆菌HD的筛选、鉴定及发酵条件优化

作者:鲁雷震; 宏丹; 封成玲; 贾紫伟; 周景波; 宁亚维; 贾英民; 王志新*
来源:中国食品学报, 2022, 22(03): 212-224.
DOI:10.16429/j.1009-7848.2022.03.024

摘要

目的:从土壤中筛选产抗真菌肽的菌株,并通过优化其发酵条件提高产量。方法:用琼脂扩散法筛选菌株;通过形态观察、理化测定和16S r DNA序列分析鉴定菌株;采用蛋白酶处理、硫酸铵沉淀、膜透析、热稳定性研究确定抑菌物质;采用单因素和正交试验优化其发酵条件,并在发酵罐中放大验证。结果:获得1株产抗真菌物质的菌株,鉴定为爱媛类芽孢杆菌,命名为爱媛类芽孢杆菌(Paenibacillus ehimensis)HD。所产抑菌物质为小分子多肽,分子质量约1 ku,其抑菌谱广,能抑制多株腐败真菌和致病细菌。爱媛类芽孢杆菌HD发酵产抗真菌肽最佳条件为:甘露醇2.5 g/L,MgSO43.0 g/L,鱼蛋白胨10 g/L,初始pH 7.5,装液量40 mL/250 mL,接种量1×108 CFU/mL,摇床转速220 r/min,发酵温度32℃,发酵时间32 h。在该条件下,抗真菌肽效价为324.92 AU/mL,比优化前提高了3.63倍。在5 L和30 L发酵罐中进行发酵验证,抗真菌肽效价分别为371.01 AU/mL和364.05 AU/mL,产量达到最高时的时间提前至20 h。结论:爱媛类芽孢杆菌HD所产抗菌肽具有较好抑菌作用,且经发酵优化与放大后产量稳定。

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